摘要
目的:蜱保护性蛋白在蜱疫苗的发展以及蜱相关病原的感染方面得到了广泛使用。因此,研究残缘璃眼蜱4D8及Rs86基因协同作用下的蜱发育及对环形泰勒虫传播能力的影响尤为重要。方法:本研究采用q PCR方法对残缘璃眼蜱4D8及Rs86基因在不同发育阶段及不同组织间的表达丰度进行检测。并利用体外克隆技术将获得的残缘璃眼蜱饥饿成蜱4D8及Rs86基因亚克隆至p MD18-T载体进行测序。以获得的阳性克隆为基础设计特异性引物,在同一蜱体内进行4D8和Rs86基因的同时干扰。动物实验分析干扰后蜱虫在吸血、饱血程度、产卵及卵孵化过程等生理指标变化情况。同时利用干扰后的蜱虫进行环形泰勒虫的传播实验,分析该基因协同下对环形泰勒虫传播能力的影响。结果:结果显示,4D8和Rs86基因在残缘璃眼蜱不同发育阶段及不同组织间均有不同程度的表达。清洁蜱中4D8和Rs86基因在卵巢中有较高的表达丰度,不同发育阶段表达丰度无明显差别。感染了环形泰勒虫的残缘璃眼蜱4D8和Rs86基因在唾液腺中有较高水平的表达。动物实验说明,干扰后的蜱虫在饱血量,饱血时间以及产卵量,卵发育时间等生理指标和对照组有明显的差异。且在该基因协同作用下对环形泰勒虫传播能力显著下降。两基因间的协同作用可更有效的影响蜱虫发育,影响效率为单一基因的影响效率的2.35倍。同样两基因的协同作用使得环形泰勒虫的感染率下降近3/5倍。结论:以上结果说明,作为同一家族的两个保护性基因4D8和Rs86在蜱发育的各个阶段及不同组织间都有不同程度的表达,说明其在发育过程中的必要性。4D8和Rs86协同作用较单一基因对蜱的影响更为重要。这为蜱疫苗的制备及防控提供了参考。
引文